Андрей
Муж., 37 лет. Беларусь Пинск |
Обращаю ваше внимание, что Минске уже лечат клетками стволовыми эпилепсию после травм головы. Но мне моему-то кажется ели они лечат эпилепсию после травм, то и могли бы лечить алкогольную энцефалопатии и органическое поражение мозга. И прошу заметить этим методом лечат в Минске а не за границей. Я не врач, но я понимаю так что нейрон разрушет от трамы точно так же как и после алкоголизма хронического, сответственно, если эта терапия лечит последствия травм головы она наверное могла бы и последствия алкоголизма вылечить. Эта процедура проводится бесплатно в Минске, а не в Германии. Единственно то, что у еня была как врачи пишут паранойя, мне казалось что за мной следят, если кто-то говорит и мне казалось, что говорят обо мне, а сейчас этот зловонный запах из головы может это тоже признак крытой эпилепсии. Могут меня и не взять. Мне кажется после травм мозг поражается, то и после алкоголизма нейроны точно так же разрушаются. Единственно то, что стволовая клетка замещает пораженный участок травмой Но тут описаны частые признаки эпилепсии. Критериями включения являлись: мужчины и женщины в возрасте старше 20 лет; частые приступы; наличие резистентной формы эпилепсии, когда любые комбинации 2–3 противоэпилептических средств, вклю- чая новейшие, не оказывали заметного влияния на частоту и тяжесть приступов (карбамазепин, вальпроевая кислота, то- пирамат, ламотриджин, фенобарбитал — в виде монотерапии и в различных комбинациях). Критериями исключения яв- лялись: воспалительные процессы головного мозга; хронически протекающие психозы с частыми декомпенсациями, сла- боумием и выраженной социальной дезадаптацией; наличие хронических соматических и неврологических заболеваний в стадии обострения, требующих активной терапии; новообразования. Под наблюдением находились 22 пациента (13 мужчин и 9 женщин) с фармак БЕЗОПАСНОСТЬ И ПЕРСПЕКТИВНОСТЬ ЛЕЧЕНИЯ СИМПТОМАТИЧЕСКОЙ ЭПИЛЕПСИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АУТОЛОГИЧНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА Докукина Т.В.1 , Хлебоказов Ф.П.1 , Игнатенко С.И.2 , Космачева С.М.2 , Гончарова Н.В.2 , Потапнев М.П.2 , Махров М.В.1 , Королевич П.П.1 , Шамрук И.В.1 , Мисюк Н.Н.1 1 Государственное учреждение «Республиканский научно-практический центр психического здоровья», Минск, Республика Беларусь; 2 Государственное учреждение «Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий», Минск, Беларусь Реферат. В статье представлены данные о применении аутологичных мультипотентных мезенхимальных стро- мальных клеток (ММСК) для лечения 10 пациентов с медикаментозно-резистентной симптоматической эпилепсией. По- казано, что внутривенное введение 40,0–101,0 млн (в среднем 68,2±8,48 млн) ММСК и через 5–7 дней эндолюмбальное введение 2,7–8 млн (в среднем 6,34±0,72 млн) нейроиндуцированных ММСК не вызвало у пациентов неблагоприятных реакций и осложнений. Более того, при сроках наблюдения 12–21 мес. у 8 из 10 пациентов отмечено снижение или исчез- новение приступов, уменьшение их тяжести. Сделан вывод о перспективности использования предложенной технологии клеточной терапии для лечения фармакорезистентных форм симптоматической эпилепсии. Ключевые слова: симптоматическая эпилепсия, резистентные приступы, мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, трансплантация, электроэнцефалограмма. Введение. Эпилепсия является одним из наиболее распространенных нервно-психических заболеваний. В мире насчитывается более 50 млн пациентов с эпилепсией [5]. Эпилепсия — это сложное, полиморфное по своим проявлениям заболевание, в патогенезе которого ведущую роль играет первичное локальное повреждение межнейрональных связей го- ловного мозга или генетически обусловленное гипервозбуждение с последующей гибелью нейронов, т. е. нейродегенера- ция. В последние годы установлено, что продолжительные судорожные приступы вызывают повреждение головного моз- га, и даже однократный припадок может привести к «апоптозоподобной» гибели нейронов [4]. С другой стороны, при экс- периментальной височной эпилепсии у животных было показано, что судороги не только повреждают гиппокампальную формацию, но и стимулируют нейрогенез [10]. Клеточная терапия рассматривается как перспективный подход для лечения эпилепсии из-за ограниченности тера- певтической эффективности противоэпилептических препаратов в 20–40% случаев у пациентов, страдающих этой болез- нью. В настоящее время технологии лечения стволовыми клетками оценены в доклинических исследованиях, продемон- стрировавших их благотворное влияние на припадки у экспериментальных животных. Локальное действие стволовых кле- ток на звенья патогенеза эпилепсии связывают с секрецией нейротрофических факторов и противовоспалительным дей- ствием [6, 7]. При наличии повреждения в организме пациентов ММСК мигрируют в область деструкции и под влиянием ми- кроокружения дифференцируются в тканеспецифичные стромальные и специализированные клетки [7]. Нейрогенно- дифференцируемые ММСК человека выделяют нейротрофический фактор головного мозга, который оказывает нейропро- тективное действие на нервные клетки, что способствует уменьшению частоты и тяжести эпилептических приступов [9]. Экспериментальные исследования Holmes G.L. et al. (1991) показали, что введенные ММСК регулируют постсинаптиче- 27 ские потенциалы возбуждения за счет влияния на концентрацию гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) [8]. На сегодняш- ний день широко обсуждается высокий потенциал ММСК и индуцированных плюрипотентных стволовых клеток для ле- чения различных неврологических заболеваний. Тем не менее сохраняются некоторые препятствия для клинического при- менения клеточной терапии, поэтому широкомасштабные клинические испытания не проводились [7]. Цель работы — предварительная оценка безопасности и эффективности применения наращенных in vitro аутоло- гичных ММСК у пациентов с резистентной симптоматической эпилепсией. Материалы и методы. Характеристика пациентов. Клинические исследования проводили в стационаре ГУ «РНПЦ психического здоровья» Министерства здравоохранения Республики Беларусь в течение 2011–2015 гг. Исследование было одобрено Этическим комитетом центра. Все пациенты подписывали информированное согла- сие для участия в исследовании. Критериями включения являлись: мужчины и женщины в возрасте старше 20 лет; частые приступы; наличие резистентной формы эпилепсии, когда любые комбинации 2–3 противоэпилептических средств, вклю- чая новейшие, не оказывали заметного влияния на частоту и тяжесть приступов (карбамазепин, вальпроевая кислота, то- пирамат, ламотриджин, фенобарбитал — в виде монотерапии и в различных комбинациях). Критериями исключения яв- лялись: воспалительные процессы головного мозга; хронически протекающие психозы с частыми декомпенсациями, сла- боумием и выраженной социальной дезадаптацией; наличие хронических соматических и неврологических заболеваний в стадии обострения, требующих активной терапии; новообразования. Под наблюдением находились 22 пациента (13 мужчин и 9 женщин) с фармакорезистентными формами эпилеп- сии, распределенные в 2 исследовательские группы с применением рандомизации. Возраст пациентов составил от 20 до 56 лет, длительность болезни — от 7 до 29 лет. У всех пациентов отмечалась симптоматическая форма эпилепсии. Наи- более частым этиологическим фактором являлись нейроинфекция, перинатальная патология и черепно-мозговая травма. По результатам исходного клинического исследования установлено, что у всех пациентов отмечалась высокая ча- стота эпилептических приступов — более 3-х в мес. Характер приступов представлен в таблице 1. Таблица 1. — Характеристика пациентов, включенных в исследование Критерии Группа сравнения (стандартный протокол лечения) Основная группа (терапия с использованием ММСК) Количество пациентов 12 10 Женщины/мужчины 5/7 4/6 Возраст, Me (M±m), годы 32,5 (20–56) 31,5 (20–44) Возраст появления приступов, Me (M±m), годы 9,3 (1–33) 14,3 (2–38) Когнитивные нарушения 12/12 10/10 Личностные расстройства 3/12 1/10 Тип приступов: генерализованные тонико-клонические комплексные парциальные простые парциальные несколько видов приступов 7 10 3 8/12 8 7 2 7/10 При первоначальной оценке психического состояния пациентов, согласно Международной классификации болез- ней 10-го пересмотра, когнитивные расстройства выявлены у всех пациентов, органическое расстройство личности — в 4-х случаях (таблица 1). Общее клиническое исследование проводилось согласно протоколам обследования психических и неврологиче- ских пациентов. Проводился объективный осмотр, тщательное клинико-лабораторное и функциональное обследование. Пациенты консультировались врачом-неврологом, врачом-терапевтом, врачом-психиатром, врачом-окулистом, врачом- отоларингологом, психологом, женщины были осмотрены врачом-гинекологом. Всем пациентам проводилось структури- рованное психиатрическое интервью. Заболевание характеризовалось симптомами диффузного поражения головного моз- га, частыми эпилептическими приступами, тяжелыми постприступными состояниями, сопутствующими психическими расстройствами. Комбинированная трансплантация аутологичных ММСК проводилась на фоне противоэпилептической терапии. Для исследования функционального состояния головного мозга, определения типа эпилептического приступа, а также путей и зон распространения эпилептогенных импульсов, оценки эффективности лечения пациентам в динами- ке проводилась электроэнцефалография (ЭЭГ) и видеомониторирование ЭЭГ. Для оценки когнитивных функций исполь- зовался тест MMSE. Процессы произвольного внимания и работоспособность изучались при помощи «таблиц Шульте» и «счета по Крепелину» [2]. Исследование кратковременной памяти проводилось при помощи методики запоминания 10 слов Лурия А.Р. [1]. Исследование тревожности проводилось при помощи теста «Шкала реактивной и личностной тре- вожности» (опросник Спилбергера Ч.Д. в модификации Ханина Ю.Л.), позволяющего дифференцированно измерять тре- вожность и как личностное свойство, и как состояние [3]. Для оценки тревоги и депрессии использовалась «Госпитальная шкала тревоги и депрессии». Ожидаемый положительный клинический эффект базировался на представлениях о трофическом и иммуносупрес- сорном действии ММСК на нейродегенеративные и воспалительные процессы при эпилепсии [6, 7]. ММСК. Для получения аутологичных ММСК у пациентов осуществляли забор 40 мл костного мозга под мест- ной анестезией из гребня подвздошной кости. Костномозговой пунктат транспортировали в специализированную лабо- 28 раторию для выделения ММСК из фракции мононуклеаров методом адгезии на пластике и последующего культивиро- вания в течение 3–5 недель (2–3 пассажа) в питательной среде альфа-МЕМ с рибонуклеозидами и глютамаксом (Sigma, Invitrogen), 5% сыворотки АВ (IV), 100 ед./мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина. В процессе культивирования кон- тролировали стерильность, оценивали морфологию и пролиферативную активность клеток. Нейрогенную дифференцировку части выросших in vitro ММСК проводили путем дополнительного культивирова- ния в среде Neurocult-XF proliferation medium (StemcellTech.) в течение 7 дней. Контроль качества ММСК перед введени- ем включал стерильность, фенотипический контроль клеток, для нейродифференцированных ММСК — наличие генети- ческих маркеров нейродифференцировки (нестин, NSE). Этапы терапии с использованием аутологичных ММСК. Введение аутологичных ММСК осуществляли в усло- виях стационара на фоне стандартной противоэпилептической терапии с определением концентрации препаратов в кро- ви. С целью уменьшения риска побочных эффектов трансплантацию ММСК пациентам проводили в 2 этапа. На первом этапе проводилась трансплантация аутологичных недифференцированных ММСК: однократное медленное внутривенное введение 40,0–101,0 млн (в среднем 68,2±8,48 млн) клеток в 20 мл раствора натрия хлорида 0,9% для инфузий, содержа- щего 5% аутологичной сыворотки. Жизнеспособность клеток в трансплантате составляла 98,1±0,26%. Более 95% ММСК экспрессировали маркеры CD105, CD90, и менее 5% — CD45, CD34. За время наращивания клеточной массы количество клеток увеличилось в среднем в 1,04×105 раза. На втором этапе через 5–7 дней после первой трансплантации пациенту вводили в спинномозговой канал 2,7–8 млн (в среднем 6,34±0,72 млн) нейроиндуцированных ММСК в 5 мл раствора на- трия хлорида 0,9% для инфузий, содержащего 5% аутологичной сыворотки. Жизнеспособность клеток составляла 98,8%. Процедуру проводили при укладывании пациента на кушетку на бок, на уровне промежутка позвонков L3–L4 под мест- ной анестезией 0,5% раствора новокаина. Оценку безопасности цикла клеточной терапии с использованием аутологичных ММСК проводили путем оценки лабораторной и клинико-нейрофизиологической реакции пациентов на процедуру введения клеточного материала. Результаты трансплантации аутологичных ММСК оценены в сроки наблюдения от 3 до 17 мес. после их введения. Тяжесть состояния пациентов оценивали в соответствии с клиническими, нейрофизиологическими и патопсихологиче- скими критериями. Результаты и их обсуждение. Безопасность процедур, связанных с клеточной терапией, была оценена у всех па- циентов с эпилепсией. Все они хорошо перенесли процедуру забора костного мозга и трансплантацию ММСК: побочных эффектов или аллергических реакций зафиксировано не было. Средний возраст пациентов обеих групп составил около 32 лет. Соотношение числа женщин и мужчин было сопо- ставимо в обеих группах. Возраст появления приступов варьировал в широких пределах, в то время как средние значения также были сопоставимы. У всех обследованных пациентов отмечались когнитивные расстройства. По характеру присту- пов пациенты обеих групп также не различались (таблица 2). Таблица 2. — Частота приступов у пациентов в исследуемых группах Показатель Группа сравнения (стандартный протокол лечения), n = 12 Основная группа (терапия с использованием ММСК), n = 10 Частота приступов, раз в мес. через 3 мес. через 12–15 мес. через 3 мес. через 12–21 мес. Ремиссия Снижение частоты более чем на 50% 0/12 4/12 0/12 2/12 1/10 1/10 3/10 5/10 Снижение частоты менее, чем на 50% Без эффекта 1/12 7/12 1/12 9/12 5/10 3/10 1/10 1/10 Основанием для клеточной терапии пациентам с эпилепсией являлись неэффективность проводимой ранее фарма- котерапии и согласие пациентов на осуществление клеточной терапии, включая процедуры забора костного мозга, а так- же внутривенное и эндолюмбальное введение наращенных in vitro аутологичных ММСК. Мы оценивали изменения в состоянии пациентов обеих групп более 1 года после терапии. Как показано в табли- це 2, в течение 12–15 мес. после начала исследования у 10 из 12 пациентов группы сравнения отсутствовал эффект (зна- чимое изменение частоты приступов, результатов анкетирования, ЭЭГ записи). Пациенты основной группы, получившие комплексное лечение с использованием ММСК, достигли значимо лучших результатов: у 30% пациентов достигнута дли- тельная ремиссия в период 12–21 мес. после терапии (отсутствие приступов в течение более чем 6 мес.), у 80% пациентов отмечался значимый клинический ответ. У большинства пациентов основной группы отмечалась трансформация генера- лизованных тонико-клонических приступов в комплексные парциальные (психомоторные) и даже простые парциальные приступы. Следует отметить, что эффект влияния ММСК на состояние пациента был более очевидным в долговременной перспективе (12 мес. и более) по сравнению с эффектом через 3 мес. после применения клеточной терапии. Достижение стойкой клинической ремиссии у 3 пациентов основной группы через 12 мес. после лечения сопрово- ждалось положительными изменениями на ЭЭГ в виде снижения пароксизмальной активности, уменьшения числа вспы- шек вследствие положительного влияния трансплантации МСК на метаболизм головного мозга. Анализ ЭЭГ свидетель- ствует о нормализации пиковой частоты у 4 из 10 пациентов исследуемой группы и у 1 из 12 пациентов группы сравне- ния. Таким образом, результаты ЭЭГ-исследования как визуальные, так и компьютерные, коррелировали с положительной динамикой клинических показателей. 29 Заключение. В исследовании мы представили первые результаты клинического применения ММСК для терапии пациентов с резистентной эпилепсией. Вопрос безопасности клеточной терапии широко обсуждаем. Во-первых, мы ис- пользуем аутологичные стволовые клетки во избежание иммунной сенсибилизации трансплантированных клеток. Во- вторых, для клинического применения мы используем генетически неизмененные стволовые клетки, чтобы избежать пе- репрограммирования стволовых клеток или использования экзогенной ДНК, которые несут риск нестабильности генома и генетических мутаций с неизвестными последствиями в долгосрочной перспективе. В-третьих, мы использовали два ме- тода доставки ММСК в организм пациента с эпилепсией (внутривенный, эндолюмбальный). Наше исследование продолжается, но уже полученные первые данные наглядно продемонстрировали безопас- ность применения трансплантации ММСК для лечения резистентной эпилепсии. Мы не выявили никаких неблагоприят- ных реакций и осложнений, изменений лабораторных или клинических показателей после применения клеточной тера- пии. Кроме того, в основной группе пациентов отмечались положительные эффекты терапии (в т. ч. ремиссия более 6 мес.) в отличие от пациентов из группы сравнения. Первый опыт проведения клеточной терапии пациентам с эпилепсией в Республике Беларусь показал, что внутри- венное введение аутологичных ММСК и эндолюмбальное введение нейроиндуцированных аутологичных ММСК может быть эффективной дополнительной терапией выбора у пациентов с фармакорезистентной формой заболевания. Получен- ные предварительные данные подтверждают безопасность, а также перспективность использования стволовых клеток че- ловека для терапии пациентов с эпилепсией. Дополнительные исследования необходимы для определения более четких показаний (формы эпилепсии, степе- ни тяжести заболевания, сопутствующих нарушений) к проведению трансплантации аутологичных ММСК и определения целесообразности повторных курсов клеточной терапии. Литература 1. Бизюк, А.П. Компендиум методов нейропсихологического исследования / А.П. Бизюк. — СПб.: Речь, 2005. — 400 с. 2. Блейхер, В.М. Клиническая патопсихология: рук. для врачей и клинических психологов / В.М. Блейхер, И.В. Крук, С.Н. Бо- ков. — М.: Изд-во Моск. псих.-соц. ин-та; Воронеж: «МОДЕК», 2006. — 624 с. 3. Дерманова, И.Б. Диагностика эмоционально-нравственного развития. Исследование тревожности (Ч.Д.Спилбергер, адаптация Ю.Л.Ханин) / И.Б. Дерманова. — СПб., 2002. — С. 124–126. 4. Neuronal apoptosis after brief and prolonged seizures / J. Bengzon [et al.] // Prog. Brain Res. — 2002. — Vol. 135. — P. 111–119. 5. de Boer, H.M. The global burden and stigma of epilepsy / H.M. de Boer, M. Mula, J.W. Sander // Epilep. Behav. — 2008. — Vol. 12, № 4. — P. 540–546. 6. Finding a better drug for epilepsy: anti-inflammatory targets / S. Dedeurwaerdere [et al.] // Epilepsia. — 2012. — Vol. 53, № 7. — P. 1113–1118. 7. Ess, K.C. Patient heal thyself: modeling and treating neurological disorders using patient-derived stem cells / K.C. Ess // Exp. Biol. Med. — 2013. — Vol. 238, № 3. — P. 308–314. 8. Holmes, G.L. Effect of neural transplants on seizure frequency and kindling in immature rats following kainic acid / G.L. Holmes // Dev. Brain Res. — 1991. — Vol. 64, № 1–2. — P. 47–56. 9. Finding a better drug for epilepsy: antiepileptogenesis targets / K. Kobow [et al.] // Epilepsia. — 2012. — Vol. 53, № 11. — P. 1868–1876. 10. Parent, J.M. Mechanisms and functional significance of aberrant seizure-induced hippocampal neurogenesis / J.M. Parent, G.G. Murphy // Epilepsia. — 2008. — Vol. 49, suppl. 5. — P. 19–25. THE USE OF AUTOLOGOUS MESENCHYMAL STEM CELLS FOR THERAPY OF PATIENTS WITH SYMPTOMATIC EPILEPSY Dakukina T.V.1 , Hlebokazov F.P.1 , Ighnatenko S.I.2 , Кosmacheva S.M.2 , Goncharova N.V.2 , Potapnev M.P.2 , Makhrov M.V.1 , Korolevich P.P.1 , Misyuk N.N.1 1 State Institution “Republican Scientific & Practical Center of Mental Health”, Minsk, Republic of Belarus; 2 State Institution “Republican Scientific & Practical Center of Transfusiology & Medical Biotechnologies”, Minsk, Republic of Belarus; An article presented the data on application of autologous mesenchymal stem cells (MMSCs) for therapy of 10 patients suffering from drug-resistant symptomatic epilepsy. Intravenous injection of 40.0–101.0×106 (mean 68.2±8,48×106 ) MMSCs endolumbal injection of 2.7–8.0×106 (mean 6.34±0.72×106 ) neuroinduced MMSCs did non induced in patients unfovarable reactions and complications. During 3–11 months of monitoring 5 of 10 patients demonstrated decrease the frequency or disappearance of seizures. We concluded that application of MMSC-base cellular therapy is safe and enable to facilitate seizure status in patients with drug-resistant symptomatic epilepsy. Keywords: symptomatic epilepsy, drug-resistant seizures, mesenchymal stem cells, transplantation, electroencephalogram. |
Врач-психотерапевт, Психиатр, Психолог г. Москва
Что Вы хотите от консультантов сайта?
Время создания: 15 Января 2018 00:28 :: Тип участия: Прямая специальность
Оценок: 0
|
врач-психотерапевт, психиатр, нарколог. Запись по смс на тел. :±79095937333
В чем заключается Ваш вопрос врачам?
Время создания: 15 Января 2018 01:11 :: Тип участия: Прямая специальность
Оценок: 0
|
Независимый консультант. Онлайн-чат: https://t.me/psihoterapevt_onlayn
Есть желание решать проблему грамотно и квалифицированно, обращайтесь к конкретному специалисту лично, и начинайте работать с врачом. Перепиской в интернете - вы свои проблемы точно не решите.
Время создания: 15 Января 2018 09:56 :: Тип участия: Прямая специальность
Оценок: 0
|
Врач-психиатр, психотерапевт - г. Донецк.
Для чего Вы все это присылаете сюда?
Время создания: 15 Января 2018 10:55 :: Тип участия: Прямая специальность
Оценок: 0
|